小鼠舌表皮细胞

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细胞名称: 小鼠舌表皮细胞


种属来源: 小鼠


组织来源: 实验动物的正常舌组织


特    征: 正常原代细胞


细胞形态: 铺路石状细胞，不规则细胞


生长特性: 贴壁生长


培 养 基: 我们使用elitecell原代星状细胞培养体系作为体外培养原代肝星状细胞的培养基。


生长条件: 气相：空气，95%；---，5%; 温度：37 ℃,


传代方法: 1：2至1：6，每周2次。


冻存条件: 90% 完全培养基+10% dmso，液氮储存


细胞鉴定: 广谱角蛋白(pck)免疫荧光染色为阳性，经鉴定细胞纯度高于90%。


qc检 测: 不含有 hiv-1、 hbv、hcv、支原体、---、酵母和---。




特点和简介
舌表皮细胞经常轻度教化脱落，与唾液和食物碎屑混合而形成一层白色薄苔。表皮细胞的主要作用是保护，同时还兼有其他功能，如分泌角质层等，具有很强的角质化特征。


接受后处理
1) 收到细胞后，请检查是否漏液 ，如果漏液，请拍照片发给我们。


2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态，去掉封口膜并将t25瓶置于37℃培养约2-3h。


3) 弃去t25瓶中的培养基，添加 6ml本公司附带的完全培养基。


4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。


5) 接到细胞次日，请检查细胞是 否污染，若发现污染或---污染，请及时与我们取得联系。


培养操作
1）复苏细胞：将含有 1ml 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加 入 4ml 培养基混合均 匀。在 1000rpm 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补 加 1-2ml 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜（或将 细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并 检查细胞密度。


2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。


1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 pbs 润洗细胞 1-2 次。


2. 加 1ml ---液（0.25%trypsin-0.53mm edta）于培养瓶中，置于 37℃培 养箱中--- 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞---情况，若细胞大部分 变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。


3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000rpm 条件下离心 4 分 钟，弃去上清液，补加 1-2ml 培养液后吹匀。


4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。


3）细胞冻存：待细胞生长状态---时，可进行细胞冻存。下面 t25 瓶为类；


1. 小鼠舌表皮细胞 冻存时，弃去培养基后，pbs 清洗一遍后加入 1ml 胰酶，细胞变圆 脱 落后，加入 1ml 含血清的培养基终止---，可使用血球计数板计数。


2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加 入血 清和 dmso，轻轻混匀，dmso 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻 存管做好标识。


3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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